组织匀浆机是一种新型高速匀浆机的供试液制备仪器,它由大功率高速电机通过连轴器带动装在杯座上的搅拌刀高速旋转,将检品快速、*地打碎、均质,与常规法制备的供试液相比,制备的供试液具有匀浆均匀、制备供试液快速等特点。不锈钢匀浆杯可以整体消毒处理,方便安全。可供医学、制药、化妆品、食品、微生物检定作固体、液体、油剂的粉碎,均质和乳化之用。
组织匀浆机供试品(固体、液体、油剂等)通过匀浆杯内高速旋转的刀片(搅拌刀、研磨刀、匀浆刀、绞肉刀)的研磨、搅拌,达到粉碎、均质和乳化的效果。
对于匀浆的多种方式主要有:手工匀浆、机器匀浆、超声匀浆以及反复冻融。
1.手工匀浆:将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中,再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块,一起倒入匀浆管中进行匀浆,左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6-8分钟),充分研碎,使组织匀浆化。
2.机器匀浆:用组织捣碎机10000-15000r/min上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3-5次,在冰水中进行),皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
3.超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎,可用超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎,也可用国产超声波发生仪,用40安培,5秒/次,间隙10秒反复3-5次。
4.反复冻融:培养或者分离的细胞可以用以上的方法匀浆,也可以反复冻溶3次左右(即让细胞加适量的低渗液或者双蒸水放低温冰箱中结冰,溶解,再结冰,再溶解,反复3次左右),但有部分酶活力会受影响。
取少量组织匀浆做涂片(直接涂片、染色均可),显微镜下观察细胞是否磨破,若没有破则可以延长匀浆时间或增加冻融次数。